Page 3 - E-Tez Bülteni Mart 2025, SAYI 1
P. 3

Tez Özeti

        Sterilizasyon işlemi sağlık sektöründe, cerrahi aletler, tıbbi cihazlar, laboratuvar ekipmanları ve ilaç üretim süreçlerinde hayati önem
        taşımaktadır.  Sterilizasyonun  doğruluğunu  ölçmek  için  biyolojik  indikatörler  kullanılmaktadır.  Biyolojik  indikatörlerin  çalışma
        mekanizması, bakteri hücrelerinin ortama salgıladığı enzimlerin aktivitesine dayanmaktadır. Tezin amacı, daha aktif glukosidaz ile
        sterilizasyonun başarısız olması halinde çok daha erken cevap veren bir indikatör bakterisi geliştirmektir. Bu amaçla, Geobacillus
        stearothermophilus bakterisinin alfa glukosidaz genlerinin klonlanması, E. coli’de ifadesi, saflaştırılması, nokta mutasyonları ile enzim
        aktivitesinin artırılması yapılmıştır. Son olarak en aktif mutant seçilerek, bu aktif glukosidaz geninin Geobacillus stearothermophilus’a
        tekrar aktarılma deneyleri gerçekleştirilmiştir. Sonuç olarak, α-glukosidaz ve oligo-α-glukosidaz genleri E. coli’de başarılı bir şekilde
        ekspres  edilmiştir.  Bu  iki  gen  üzerinde  on  adet  nokta  mutasyonu  yapılmış  ve  bu  enzimlerin  biyokimyasal  karakterizasyonu
        gerçekleştirilmiş ve Km, Vmax ve kcat değerleri hesaplanarak, enzim aktiviteleri karşılaştırılmıştır. Ardından, katalitik aktivitesi yüksek
        mutant  seçilerek,  mekik  vektör  pNW33N’ye  klonlanmıştır  ve  mutant  vejetatif  Geobacillus  stearothermophilus  hücrelerinin  yaban
        hücrelere  kıyasla  daha  yüksek  aktivite  gösterdiği  tespit  edilmiştir.  Son  olarak,  Mutant  Geobacillus  stearothermophilus  sporlarıyla
        gerçekleştirilen germinasyon çalışmaları, ticari biyolojik indikatörlerle karşılaştırılmış ve benzer sonuçlar elde edilmiştir.

                Anahtar kelimeler: Sterilizasyon, Geobacillus stearothermophilus, Alfa Glukosidaz, Enzim aktivitesi
   1   2   3   4   5   6   7   8